产品货号:
SK253-2
中文名称:
考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒(可见分光光度法)
英文名称:
产品规格:
50管/48样
发货周期:
1~3天
产品价格:
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样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

在酸性溶液中,考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在620nm处有最大吸收峰,其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。

| 组分 | 规格 |
| 试剂一 | 30mL |
| 说明书 | 1份 |
保存:2~8℃,有效期3个月。

离心机、分光光度计、石英比色皿、移液器和蒸馏水。

- 液体样品:澄清液体样品可以直接测定。
- 组织样品:按照组织质量(g)∶提取液体积(mL)=1∶20的比例(建议称取约0.05g组织,加入1mL提取液)冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即待测液。
- 提取液自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水。
- 动物样品常常需要稀释。
- 提取液自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水。
- 细菌、真菌样品:按照细胞数量(104个)∶提取液体积(mL)=500~1000∶1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

- 分光光度计预热30min,蒸馏水调零。
- 在石英比色皿中加入:
试剂(μL) 测定管 空白管 样本 500 蒸馏水 500 试剂一 500 500 混匀后,测定波长620nm吸光值,△A=A测定-A空白。 - 空白管只需要测定一次。
- 测定管的待测样品蛋白质浓度要控制在1~100μg/mL范围内,尽量控制在中间范围。
- 测定管若出现浑浊或分层现象,就说明蛋白含量较高,通常须将待测液用提取液稀释10~20倍后重新检测。
- 空白管只需要测定一次。

标准曲线:y=14.253x-0.0007;
R2 = 0.9997;x:蛋白标准品浓度(mg/mL;线性范围为0.001~0.1mg/mL);y:吸光值差值
- 按液体样本体积计算:
Cpr(mg/mL)=(△A+0.0007)÷14.253=0.07×(△A+0.0007) - 按组织样本质量计算:
Cpr(mg/g鲜重)=(△A+0.0007)÷14.253×V总÷W=0.07×(△A+0.0007)÷W
V总:提取液体积,1mL;W:样本质量,g。
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